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液相色谱仪方法推荐「创新通恒」

发布时间:2021-11-08 23:49:56        

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视频作者:北京创新通恒科技有限公司







如何用制备色谱柱制备低含量的杂质?

制备色谱柱为ZorbaxSB-C18 9.4*250mm及gilson馏分收集器,色谱仪为Agilent1100或LC-6A。想用其制备面积***化法含量为0.05%左右的杂质,初步提纯后用高分辨的LC-MS进行定性分析。如何设定色谱条件,如,流量、进样量、样品的浓度、切割点的设置、是否要浓缩,要求将95%以上的主峰切除。

(主峰后有二个杂质靠得很近。)

答:

1.制备用的流动相尽量等级高一点,否则流动相中的杂质会影响LC-MS分析。

2.使用馏分收集器时,延迟体积一定要计算准确,检测器的响应时间设到很小,否则都会影响收集的纯度和回收率。制备柱的流速一般与直径的平方成正比,如果4.6mm分析柱流速为1mL/min,9.4mm制备柱用1*(9.4/4.6)2,大约为4mL/min。进样量设到几个mg应该基本没有过载。进样样品浓度越高越好。假如进样10mg,理论计算0.05%的杂质大约只有5μg,显然浓度太低,尽量是多做几次,合并馏分然后浓缩后做LC-MS分析。




工业制备色谱

分离纯化技术是制药过程的核心环节之一。分离纯化技术的优劣直接关系到的品质和安全性,而且影响到制药企业的效益和市场竞争力,寻求经济、***绿色的新型分离纯化技术一直受到广泛的重视。工业制备色谱技术具有***、高选择性、能耗和溶剂消耗低、废弃物排放少以及自动化程度高等优点,在分离纯化中的应用和需求日益广泛,是我国产业升级的重要发展方向工业制备色谱分离材料和分离方法开发是工业制备色谱技术实现在各方面应用的基础。




蛋白质的特定构象对蛋白质的生物功能起决定性的作用。而几乎所有的蛋白质必须与其他分子相结合才能发挥其功能和作用。当蛋白质的构象发生变化,例如通过加热或化学***处理等使多肽链的盘绕和折叠被解开,其空间结构发生变化, 则蛋白 质变性, 其功能和生物活性即丧失,作为现代生物科技的主要产品类型,蛋白质是结构和功能非常复杂的大分子。




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