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发布时间:2021-11-11 03:52:26
液相色谱仪
根据应用方向可以分为制备、半制备、分析等类型,使用前两种的应用都是为了制备样品,而后一种则是为了分析样品,做定性定量实验。它们在原理上相同,却也有着各自的区别,现在对前两类液相色谱仪进行比较。
都是制备型仪器,制备、半制备液相色谱仪针对的样品量和分离速度不同,半制备分离纯化的样品量少,由于泵的压力和流速会低一些,分离效率会相对低一些。但它在纯化小样和分离微量元素方面有很大用途。制备型仪器可以用在生产中,比如食品原料中农残去处,***生产中去除无效成分或***成分等。半制备型仪器更多用在实验中,它经常和全自动固相萃取仪搭配使用来更大程度纯化样品。由于泵的功率不同,仪器中各个部分的尺寸和材质也略有不同,半制备型仪器中各部分需要承受的压力较小,处理样品量少,所以从色谱柱到管道、阀门等通量都较小,而制备型仪器就要大一些以应对较大量的样品进入。操作方面基本一致,除了尺寸外没有什么其它实质区别。
半制备液相色谱层析系统开机
1、接通电脑和仪器电源(接通电源之前可先把吸头拿到要使用的流动相瓶中);
2、开仪器电源开关,一般先上后下,下为检测器开关;
3、检查流动相是否够,仪器上记录的溶剂量时候正确;
4、开电脑;
5、打开仪器联机软件进入界面,点击启动设置泵流速为10,此时仪器中应该有液体流出;
6、点击平衡然后点击每个波长和调整冲一段时间,待压力稳定后可以进样。
制备液相色谱
色谱法是根据混合物中各组分的化学特性对其进行分离的一种分离方法。
分析色谱强调的是各组分的完全分离以达到化合物确认和定量目的。而制备型(Prep)色谱或纯化色谱则是指利用色谱方法分离出一定量达到足够纯度的化合物用于后续实验或处理的色谱方法。
科学家首先要开发色谱方法,将目标化合物从原料、副反应或其它杂质中成功分离出来。从科研到工业企业纯化色谱应用非常广泛。尽管应用领域各不相同,用户的一般要求却非常相似,他们都希望分离出的终产物纯度能达到相当纯的化合物,实现科研或生产的需要。
采用液相色谱进行纯化LC纯化系统的配置与一般液相色谱系统基本相同,但增加了馏分收集器。样品混合物被进样至色谱柱,色谱柱根据组分特有的化学或物理性质对其进行分离。检出组分时,系统会将其输送至废液,或者进行收集用于后续实验。洗脱液收集操作既可由分析人员在组分洗脱时通过简单的手动方式完成,也可以全自动进行,在自动收集操作中,检测器信号会触发馏分收集器将液流输送至收集容器中。输送至收集容器的馏分纯度取决于分离过程中化合物与其它邻近洗脱杂质的分离度。制备色谱的核心竞争力总结起来就是“多,快,好,省”。
液相色谱和气相色谱相比较,在以下几个方面具有优越性
(1)气相色谱不适用于不挥发物质和对热不稳定物质,而液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制。有些样品因为难以汽化而不能通过柱子,热不稳定的物质受热会发生分解,也不适用于气相色谱法。这使气相色谱法的使用范围受到了限制。据统计,目前气相色谱法所能分析的有机物,只占全部有机物的15%~20%。另一方面,液相色谱却不受样品的挥发性和热稳定性的限制。所以液相色谱非常适合于分离生物、***有关的大分子和离子型化合物,不稳定的天然产物,种类繁多的其它高分子及不稳定的化合物。
(2)对于很难分离的样品,用液相色谱常比用气相色谱容易完成分离
(3)和气相色谱相比,液相色谱对样品的回收比较容易,而且是定量的,样品的各个组分很容易被分离出来。因此,在很多场合,液相色谱不仅作为一种分析方法,而且可以作为一种分离手段,用以提纯和制备具有中等纯度的单一物质。在气相色谱中所分离出的各样品组分虽也可以回收,但一般都不太方便,而且定量性差。液相色谱法由于具有这些气相色谱法不具备的优点,因此在许多领域得到广泛的应用。
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