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发布时间:2021-12-11 02:33:55
什么是制备性液相色谱
液相色谱是一种分析方法,制备色谱是一种分离纯化手段。液相色谱把普通的色谱柱换成制备柱,就是制备液相色谱,两者的区别在于一种以分析为目的,追求的是检测精度,样品承载量非常小;制备色谱以分离纯化为目的,它追求的是样品承载量,检测精度很低,检测只用作鉴别即可。
另外,制备色谱不仅可以用液相,还可以用气相色谱、薄层色谱、层析柱等多种载体,目前主流的制备色谱是高速逆流色谱
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液相色谱进行制备有什么优点
以液相色谱进行制备时,分离条件温和,分离检测中 不会导致试样被***,且易于回收原物。
液相色谱分离系统也由两相——固定相和流动相组成。液相色谱的固定相可以是吸附剂、化学键合固定相(或在惰性载体表面涂上一层液膜)、离子交换树脂或多孔性凝胶;流动相是各种溶剂。被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。色谱分离的实质是样品分子(溶质)与溶剂(即流动相或洗脱液)以及固定相分子间的作用,作用力的大小,决定色谱过程的保留行为。
根据分离机制不同,液相色谱可分为:液固吸附色谱、液液分配色谱、化合键合色谱、离子交换色谱以及分子排阻色谱等类型。
液相色谱仪分类方法
1、按分离目的可分:实验室液相色谱仪和工业液相色谱仪。
2、按固定相物理状态可分:液液色谱仪和液固色谱仪。
3、按色谱柱形状可分:填充柱液相色谱仪和平板液相色谱仪。
4、按分离原理可分:吸附液相色谱仪、分配液相色谱仪、离子交换液相色谱仪和凝胶液相色谱仪。
注:①吸附色谱:利用固体吸附表面对不同组分物理吸附性能的差异达到分离的色谱。②分配色谱:利用不同的组分在两相中有不同的分配系数以达到分离的色谱。③离子交换色谱:利用离子交换原理的达到分离的色谱。
液相色谱的前世今生
早在古代罗马时期,人们已知道将一滴含有混合色素的溶液滴在一块布或一片纸上,通过观察溶液展开产生的同心圆环来分析染料与色素。实际上,这种简单操作已经采用了现代色谱学的基本原理。
19世纪中叶,德国化学家Runge对古罗马人的这种方法作了重要的改进,使其具有良好的重现性与定量能力,使盐溶液可在纸上分离;另外,化学家Goppalsr-oeder也在长条纸上分离了染料和动植物色素,这些研究标志着纸色谱法的建立,并逐步发展成为现代色谱技术。
1903年,俄国植物学家Tswett在华沙自然科学学会生物学会会议上发表了题为“一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用”中,提出了应用吸附原理分离植物色素的新方法,这一工作标志着现代色谱学的开始。他将碳酸钙装入竖直的玻璃柱中,从顶端倒入植物色素的石油的醚浸取液,进一步采用溶剂冲洗,使溶质在柱的不同部位形成色带,首先向人们公开展示了采用色谱法提纯的植物色素溶液以及色谱图显示着彩色环带的柱管。Tswett将这种方法命名为色谱,管内填充物被称之为固定相,冲洗剂被称之为流动相。
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