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液相色谱的五大系统

1、进样系统进样系统分为手动进样阀和自动进样器。

2、输液系统输液泵按输出液恒定的因素分恒压泵和恒流泵。对液相色谱分析来说，输液泵的流量稳定性更为重要，这是因为流速的变化会引起溶质的保留值的变化，而保留值是色谱定性的主要依据之一。因此，恒流泵的应用更广泛。

输液泵按工作方式分为气动泵和机械泵两大类。机械泵中又有螺旋传动***泵、单活塞往复泵、双活塞往复泵和往复式隔膜泵。

3、分离系统分离系统包括色谱柱、保护柱以及柱温箱。

色谱柱：色谱柱是样品分离的核心。色谱柱在使用前必须仔细阅读说明书，了解色谱柱使用的pH值范围、溶剂耐受范围、压力范围和维护方法等事项。色谱柱使用完后，需及时对色谱柱进行冲洗。冲洗完成后，应该将色谱柱从仪器上拆下来，两端用厂家配的堵头密封后，保存在色谱柱盒里。

保护柱：保护柱的作用主要是防止吸附性强的杂质对色谱柱污染，从而延长色谱柱的寿命。针对不同型号的色谱柱，应选择相对应填料的保护柱。应注意柱芯也是有寿命的，应该定期进行更换。

柱温箱：色谱柱温度变化，可能会导致保留时间的变化。为了避免这个问题，建议使用柱温箱。

4、检测系统液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。

5、数据处理系统该系统可对测试数据进行采集、贮存、显示、打印和处理等操作，使样品的分离、制备或鉴定工作能正确开展。

半制备液相色谱层析系统开机

      1、接通电脑和仪器电源(接通电源之前可先把吸头拿到要使用的流动相瓶中);

　　2、开仪器电源开关，一般先上后下，下为检测器开关;

　　3、检查流动相是否够，仪器上记录的溶剂量时候正确;

　　4、开电脑;

　　5、打开仪器联机软件进入界面，点击启动设置泵流速为10，此时仪器中应该有液体流出;

　　6、点击平衡然后点击每个波长和调整冲一段时间，待压力稳定后可以进样。

液相色谱仪在食品检测中的应用

　实际的食品安全检测中，液相色谱仪更加适应对沸点高、热稳定性较差、分子量较高物体的测试。

　　1、N-亚的测定

　　在腊肉等腌制食品中，生产主体经常会添加或者亚作为腌制食品的发色剂，本身并不存在严重的危害，但是如果其添加的量过大，在还原作用的影响下肉制品中会生成N-亚，而N-亚对***的危害较大，长期摄入会导致和结等***。针对N-亚的传统测量方法是气相色谱法，这种方法只能对被测物体中挥发性的N-亚进行测量，测量的精度不高，而且测量过程中仅色谱测定这一环节就需要一个多小时的时间，而采用液相色谱仪全过程只需要13分钟。

　　2、多环烃和杂环芳烃的测定

　　油炸、烧烤肉制品的制作过程中常常会产生多环烃和杂环芳烃等污染物，这种污染物中包含的3,4-苯并芘、二苯并芘是典型的致***物，使用传统的氧化铝层析柱对其含量进行测量起码需要10个小时的时间，而使用液相色谱仪整个测量过程只需要数十分钟。

　　3、芳香胺的测定

　　芳香胺是人工合成色素的主要原料，长时间大量摄入会导致对***的代谢系统的强烈，容易诱发等***，由于芳香胺的添加本身是不合法的，所以对芳香胺的检测工作比较重要。通常情况下液相色谱仪测定工作会在5分钟内完成，而传统的TLC测定法则需要50分钟的时间才能完成。

液相色谱仪

20世纪初在俄国的波兰植***学家茨维特（Twseet）首先将植物提取物放入装有碳酸钙的玻璃管中，植物提取液由于在碳酸钙中的流速不同分布不同，因此在玻璃管中呈现出不同的颜色，这样就可以对各种不同的植物提取液进行有效的成分分离。

1941年，马丁与辛格用一根装满硅胶微粒的色谱柱，完成了乙酰化氨基的分离，开启了液色谱技术，因此获得诺贝尔化学奖。1949年，马丁建立了色谱保留值与热力学常数之间的关系，奠定了***色谱的基础；1952年，马丁与辛格又创立了气液色谱法，分离了脂肪酸与脂肪胺。1966年之前科学家所做的努力，为传统经典液相色谱奠定了基础。

而液相色谱仪的鼻祖则是由斯坦因与莫尔于1958年设计的氨基酸分析仪，这种仪器能够分蛋白质水解的产物。首台商用LC则是由沃特斯公司制造。

1971年之后，液相色谱技术得到了飞速的发展，HPLC的分析体制也逐步完善。到了二十世纪八十年代中期，液相色谱技术已经非常非常成熟，激动人心的新发展日趋减少，人们开始转向相关领域发展，如超临界色谱、毛管电泳色谱、制备色谱等。