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发布时间:2022-04-02 18:48:53
制备色谱之DAC如何次次装出高柱效
动态轴向压缩柱(Dynamic Axial Compression Column,DAC)是工业化制备液相色谱分离的重要组成部分。当用户填装直径50mm以上制备柱时,传统预装柱很难装出高柱效和对称性,另外预装柱使用过程柱头容易塌陷,导致柱效变差,无法满足长期持续纯化生产。DAC在运行过程中,活塞可以提供持续压力,保证很优的填装柱床密度和稳定性,从而长时间保持很佳分离效果。相比于预装柱或弹簧柱,DAC可以轻松填装和拆卸,实现不同填料反复填装和轻松切换。有人说大柱子不用考虑柱效和对称性,只要能分出样品就行。现实是色谱就是靠柱效来分离的,柱效越高,分离越好,载量越大,收率和得率越高。
通常制备色谱方法开发在4.6mm,10mm或20mm的半制备柱,然后放大到DAC50或DAC100, DAC200,DAC300, DA***50, DAC600或DAC800。理论上多大规模的色谱柱都可以实现与分析柱或半制备柱同样的效率,在现实中,设计优良的DAC柱效甚至高于预装柱。只有柱效和对称性类似才能保证了分离方法的线性放大。
工业制备色谱
蛋白质是具有一定构象(空间结构)的生物大分子:其一级结构是形成肽链的氨基酸序列(数目、种类、顺序),是蛋白质结构的基础;在一级结构水平上,部分肽链发生卷曲和折叠,形成其二级结构,这种卷曲和折叠是靠肽链中的羰基与氨基之间的氢键维持的:在二级结构的基础上,多肽链再盘绕和折叠,形成三维空间形态,即为蛋白质的三级结构:而蛋白质的四级结构是指同一蛋白质中各条肽链之间的相互关系。
制备色谱纯化中流速该如何设定
在制备纯化工艺中,想要准确、合理的确定流动相的流速范围,需要结合一定的理论基础和实际的纯化经验。为了使很多新接触制备纯化的用户能够更快、更好的对流速设定,三泰科技的Flash产品都向客户提供佳的流速范围,尤其是SepaBean? machine快速液相制备色谱系统可智能推荐的流速参数,更快更便捷的处理常规的样品分离。但是对于非常规、比较难分离的样品就必须根据分离情况进行适当的流速调整才能成功达到分离要求。今天我们就从原理和纯化经验上探讨如何找到合适的流速,更好的分离那些让人的样品。
气相色谱(GC)和高效液相色谱(HPLC)
工作温度
由于化合物的热不稳定特性,HPLC操作通常在环境温度下进行,比如操作时将液相色谱柱放入恒温箱中使用。而气相色谱柱操作的环境温度并不苛刻。
工作压力
由于液体具有较高的密度和粘度,因此对于常见的分析分离,需要在5000 – 6000 psi范围内的较高压力。UHPLC系统能够在15,000 – 18,000 psi的范围内运行。GC色谱柱中的载气要求在150 – 200 psi范围内的较低压力即可。
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