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发布时间:2022-04-13 20:26:41
实验室级别的制备液相色谱主要用于以下领域
1.天然***化学、中药化学。这是国内目前广泛的使用方法,为了弄清楚植物中的微量有效成分,开放手工色谱柱早已不够用了,几乎每个搞天然药化的实验室都至少有一台液相,土豪实验室人手一台液相。
2.蛋白纯化。相对于前者,蛋白纯化的起步要稍微晚一点,但是发展很迅速。同时,由于外国仪器厂家在这个领域的优势不算太大,目前国内也在这个领域加快发展,抢占地盘。
3.***杂质纯化。由于合成工艺并不能做到100%的产率,往往伴有副产品,如何获得微量的杂质并确定结构和含量,这就得靠液相色谱。
4.手性化合物的制备。这个主要是有机合成和方法学的在用。
液相色谱仪的使用特点进行分析概要
液相色谱仪是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术中,流动相改为高压输送,色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱;同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。 液相色谱仪特点:
1、高压:液相色谱法以液体为流动相,液体流经色谱柱,受到阻力较大,为了迅速地通过色谱柱,必须对载液施加高压。一般可达150~350×105Pa;
2、高速:流动相在柱内的流速较经典色谱快得多,一般可达1~10ml/min。液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多,一般少于1h;
3、效率很高:近来研究出许多新型固定相,使分离效率大大提高;
4、高灵敏度:液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器,进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外,用样量小,一般几个微升;
5、适应范围宽
半制备液相色谱层析系统如何进样品
1、将进样器扭到load朝上,吸取一定量待分离液,快速注入,做过的是吸取0.2毫升;
2、点击控制界面菜单栏中“运行控制”按钮样品信息设置信息存储路径(每次都要做);
3、扭动进样器,使处于inload状态,保留时间开始计时;
4、接峰;
5、所有峰出来后,点击菜单栏中的中断中断,准备重复进样。
制备液相色谱
色谱法是根据混合物中各组分的化学特性对其进行分离的一种分离方法。
分析色谱强调的是各组分的完全分离以达到化合物确认和定量目的。而制备型(Prep)色谱或纯化色谱则是指利用色谱方法分离出一定量达到足够纯度的化合物用于后续实验或处理的色谱方法。
科学家首先要开发色谱方法,将目标化合物从原料、副反应或其它杂质中成功分离出来。从科研到工业企业纯化色谱应用非常广泛。尽管应用领域各不相同,用户的一般要求却非常相似,他们都希望分离出的终产物纯度能达到相当纯的化合物,实现科研或生产的需要。
采用液相色谱进行纯化LC纯化系统的配置与一般液相色谱系统基本相同,但增加了馏分收集器。样品混合物被进样至色谱柱,色谱柱根据组分特有的化学或物理性质对其进行分离。检出组分时,系统会将其输送至废液,或者进行收集用于后续实验。洗脱液收集操作既可由分析人员在组分洗脱时通过简单的手动方式完成,也可以全自动进行,在自动收集操作中,检测器信号会触发馏分收集器将液流输送至收集容器中。输送至收集容器的馏分纯度取决于分离过程中化合物与其它邻近洗脱杂质的分离度。制备色谱的核心竞争力总结起来就是“多,快,好,省”。
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