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发布时间:2022-04-29 06:24:44
制备色谱能当分析色谱用吗?
目前,很多客户的要求都倾向于买一台液相能同时解决制备和分析的所有问题,那就相当OK。这样的客户大多是科研经费紧张,好不容易批下来点钱,不想都花在后期纯化和分析上,所以尽量二合一。
在我看来,分析液相和制备液相是通用的,只是精度的差别问题。比如,分析的液相一般流速在0.1~10mL/min,活塞的一个冲程大概是10μL,而普通的制备液相一般都是10~100mL的流速,因此活塞杆的尺寸也会变大,一个冲程差不多是100μL;流速的精度相对来说就差了很多。流速大了,管路也相应的粗了不少,以降低高流速带来的背景压力;但这样的仪器用于分析的话,柱后的扩散现象相当的厉害,即使在色谱柱上达到基线分离的两个峰,由于柱后扩散的作用,到达检测器的时候,差不多又会合到一起了;另外就是检测器的差异,主要是检测池的大小和狭缝的大小不同带来的灵敏度的不同。制备仪器一般灵敏度是分析的1/20,以保证大量进样后,不会超过量程太多而平头,分不清到底分没分开了。
倒是有个折中的办法,就是买分析型的液相,然后接个半制备的色谱柱。半制备就是直径一厘米的柱子,流速5mL以内,因此这个分析液相能达到;进样量大约是分析柱的10~20倍,检测器可能会平头,没关系,换个波长,找个吸收较弱的波长当检测波长就OK了,不是大量制备的话,我想基本可以满足需要了。
工业制备色谱
蛋白质的特定构象对蛋白质的生物功能起决定性的作用。而几乎所有的蛋白质必须与其他分子相结合才能发挥其功能和作用。当蛋白质的构象发生变化,例如通过加热或化学***处理等使多肽链的盘绕和折叠被解开,其空间结构发生变化, 则蛋白 质变性, 其功能和生物活性即丧失,作为现代生物科技的主要产品类型,蛋白质是结构和功能非常复杂的大分子。
常见色谱填料
色谱理论认为,不同的物质之间,只要存在物理、化学或生物学性质的差异,就会在不同的物相上具有不同分配系数,即可在色谱过程中得到分离、分析或测定。如果说,色谱柱是进行色谱分离的主要场所,人们常将其比喻为色谱仪的心脏;那么,色谱填料就是组成心脏的一个个细胞,因此,色谱填料的性质决定了色谱柱的性能。
根据不同的基质,色谱填料可分为:有机聚合物填料、无机基质填料、有机-无机复合型填料。目前,无机基质填料仍牢牢占据大部分市场,主要包括硅胶、氧化铝、羟基磷灰石、活性碳等。
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