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发布时间:2022-08-19 11:45:28
液相色谱操作要求
1、液相开机前先检查洗针液、柱塞清洗液是否足够; 2、液相开机后,首先确保柱塞清洗运行,再执行其它操作。 3、开机排气时,有“purge”阀的仪器应先打开“purge”阀再开泵以5ml/min的流速排气,关“purge”阀的时候先把流速降到 1ml/min再关,切不可吧顺序弄反,否则系统压力会瞬间变高。 4、使用自动进样器时,建议启用“洗针进样”方式,以降低样品残留,对于有些强残留的物质可以选择降低浓度或减小进样量。 5、液相色谱系统压力高时考虑色谱柱堵了,如果将液相色谱换成两通压力依旧高,应该考虑系统管路某部分堵了。管路堵的情况下可以使用热水清洗。对堵塞的通道可以用热水清洗。
液相色谱仪的工作原理是什么?
利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。
使用液相色谱时,液体待检测物被注入色谱柱,通过压力在固定相中移动,由于被测物种不同物质与固定相的相互作同,不同的物质顺序离开色谱柱,通过检测器得到不同的峰信号,以后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。
制备液相色谱特点和优点
高压—压力可达150~300Kg/cm2。色谱柱每米降的压为75 Kg/cm2以上。
高速—流速为0.1~10.0 ml/min。
***—可达5000塔板每米。在一根柱中同时分离成份可达100种。
高灵敏度—紫外检测器灵敏度可达0.01ng。同时消耗样品少。
HPLC与经典液相色谱相比有以下优点:
速度快—通常分析一个样品在15~30 min,有些样品甚至在5 min内即可完成。
分辨率高—可选择固定相和流动相以达到较好分离效果。
灵敏度高—紫外检测器可达0.01ng,荧光和电化学检测器可达0.1pg。
柱子可反复使用—用一根色谱柱可分离不同的化合物。
样品量少,容易回收—样品经过色谱柱后不被***,可以收集单一组分或做制备。
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