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如何用制备色谱柱制备低含量的杂质？

制备色谱柱为ZorbaxSB-C18 9.4*250mm及gilson馏分收集器，色谱仪为Agilent1100或LC-6A。想用其制备面积***化法含量为0.05%左右的杂质，初步提纯后用高分辨的LC-MS进行定性分析。如何设定色谱条件，如，流量、进样量、样品的浓度、切割点的设置、是否要浓缩，要求将95%以上的主峰切除。

（主峰后有二个杂质靠得很近。）

答：

1.制备用的流动相尽量等级高一点，否则流动相中的杂质会影响LC-MS分析。

2.使用馏分收集器时，延迟体积一定要计算准确，检测器的响应时间设到很小，否则都会影响收集的纯度和回收率。制备柱的流速一般与直径的平方成正比，如果4.6mm分析柱流速为1mL/min，9.4mm制备柱用1*（9.4/4.6）2,大约为4mL/min。进样量设到几个mg应该基本没有过载。进样样品浓度越高越好。假如进样10mg，理论计算0.05%的杂质大约只有5μg，显然浓度太低，尽量是多做几次，合并馏分然后浓缩后做LC-MS分析。

工业制备色谱

工业制备色谱系统.电气柜设置在机架内部左上端,过墙两通连接二号两通球阀,二号两通球阀通过单向阀连连接流量调节阀,一号质量流量计一端连接流量调节阀,质量流量计另一端通过混合器连接至三号三通球阀与数个进样泵,进样泵通过二号三通球阀连接压力变送器,一号三通球阀通过管道分别连接至在线过滤器与二号质量流量计,二号质量流量计则通过压力变送器与一号两通球阀连接至流量计显示器,电机连接进样泵;采用上述技术方案后,本实用新型有益效果为:其分离效率和生产能力大大高于传统的柱层析设备,并可实现在线监测,保证产品的质量.

制备色谱纯化中流速该如何设定

在制备纯化工艺中，想要准确、合理的确定流动相的流速范围，需要结合一定的理论基础和实际的纯化经验。为了使很多新接触制备纯化的用户能够更快、更好的对流速设定，三泰科技的Flash产品都向客户提供佳的流速范围，尤其是SepaBean? machine快速液相制备色谱系统可智能推荐的流速参数，更快更便捷的处理常规的样品分离。但是对于非常规、比较难分离的样品就必须根据分离情况进行适当的流速调整才能成功达到分离要求。今天我们就从原理和纯化经验上探讨如何找到合适的流速，更好的分离那些让人的样品。

气相色谱

在气相色谱中，以气体作流动相，以固定液或固体吸附剂作固定相。根据混合物与流动相、固定相之间的相对亲和力，分离混合物的挥发性成分。由于固定相的数量有限以及仪器和操作程序相对昂贵，这种技术没有得到广泛的应用。但气相色谱对热稳定、易挥发、能气化的物质具有较好的检测效果。

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