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高效液相色谱价格承诺守信「多图」

发布时间:2022-08-31 18:34:35        

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视频作者:北京创新通恒科技有限公司







高效液相色谱基线漂移的解决方法

(1)控制色谱柱和流动相的温度,并在测试前使用热交换器。

(2)采用高效液相色谱级溶剂、高纯度盐和添加剂流动相在使用前脱气,用于在线脱气或氦气脱气。

(3)用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流动槽必要时可使用1N硝酸(不要使用盐酸)

(4)移除障碍物或更换管子。参照检测器手册替换流单元格窗口。

(5)改变比率或速度。为了避免这一问题,可以定期检查流动相的组成和速度。

(6)用中等强度的溶剂冲洗并改变流动相,用10-20倍体积的新流量冲洗相对于分析柱使用离子对试剂和缓冲盐时,应注意平衡柱。

(7)检查流动相的组成采用好的化学试剂和高效液相色谱溶剂8改变分析条件。

(8)使用保护柱,如有必要,定期在样品之间或分析期间用强溶剂冲洗柱。

(9)重置基线。使用了一个新的移动相。

(10)将波长调整到很大吸收波长检测波长的重新选择。





高压液相色谱

这是指柱压一般大于20bar(或300psi)的“高压(或高效)液相色谱”,通常指所用色谱柱的塔板数大于2000,一般是在2000~20000的范围之间。

当需要从大量的物质中分离纯化不足1%的所需成分时,分离工作将会十分困难,往往在纯化的后面阶段需要使用10μm或更小颗粒的高效填料。为获得所需微量组分,可采用如下分离手段:制备型分离→半制备型分离→分析型分离→产物。为提高每次分离获得纯品的数量,制备型高压液相色谱分离通常在超载情况下运行。

高压液相色谱,即目前常用的高效液相色谱。色谱柱内填装的是粒度范围较窄的微小颗粒固定相(3~30μm),为使流动相流出,需采用较高的压力,同时系统的复杂性及成本亦增大,但分辨率可得到较大的提高。而填装较大颗粒的固定相时,如中压液相色谱系统,装柱较容易,柱的通透性较高(只需较低的泵压力),可采用更大的色谱柱和更经济的仪器,由此分辨率也较低。




高效液相色谱法概述

高效液相色谱法(HPLC)是上个世纪七十年代迅速发展起来的一项高效、快速的分析分离技术,是现代分离测试的重要手段。色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(station phase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。



HPLC的动力系统:泵

泵是HPLC的动力系统。气相色谱的动力,实际上是钢瓶中气体的压力。而液体,它只有通过泵的转动而使之流动。

我们做一个类比:血液类比成流动相,心脏类比成泵。血管类比成各不锈钢管。那么,血液在心脏作为动力系统,流经着身体的各个系统。如果心脏跳得快点,那么血流量加大,那么血压升高。同样,泵流速提高,流动相流量增大,那么色谱系统压力增大;如果血管被压迫半堵了,那么同样的心跳速度,压力也会增大。同样道理,如果色谱系统被污染,那么污染物堵在色谱柱头,或者各连接口等,那么泵同样的流速,就有可能压力变大。高效液相色谱主要出问题的就是压力莫名地增大,一般认为是色谱系统被污染而堵,解决的方法就是查看各个部件,或者清洗流路等。




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